在基因治療、細胞治療以及基礎生物學研究領(lǐng)域，病毒載體作為一種重要的基因遞送工具，其轉(zhuǎn)導效率的高低直接影響著實驗的成敗與治療效果。然而，提高病毒載體轉(zhuǎn)導效率并同時確保細胞的健康與功能，一直是科研人員面臨的重大挑戰(zhàn)。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 應運而生，憑借其配方與性能，成功攻克這些難點，為科研與臨床應用帶來新的曙光。作為AlstemBio公司的中國授權(quán)代理，上海起發(fā)強烈推薦其ViralBoost Reagent產(chǎn)品。

直擊傳統(tǒng)病毒載體轉(zhuǎn)導痛點

轉(zhuǎn)導效率提升難題的有效攻克

傳統(tǒng)的病毒載體轉(zhuǎn)導過程中，病毒與細胞表面的結(jié)合效率有限，且部分病毒在進入細胞后可能面臨內(nèi)體逃逸障礙等問題，導致大量病毒無法有效將基因遞送至細胞核，從而使得轉(zhuǎn)導效率低下。ViralBoost Reagent 通過特殊的分子機制，能夠顯著增強病毒載體與細胞表面受體的結(jié)合能力。它含有特定的功能性分子，這些分子可以與細胞表面的某些蛋白或糖基化位點相互作用，引導病毒載體更精準地錨定在細胞表面，增加病毒與細胞的接觸機會。同時，該試劑還能協(xié)助病毒突破內(nèi)體逃逸的障礙，促進病毒基因組從內(nèi)體中釋放并進入細胞核，從而大幅提高了病毒載體的轉(zhuǎn)導效率。多項實驗數(shù)據(jù)表明，使用 ViralBoost Reagent 后，慢病毒、腺病毒等常見病毒載體對多種細胞系的轉(zhuǎn)導效率可提升數(shù)倍甚至數(shù)十倍，為基因治療和細胞治療提供了更強大的基因遞送保障。

細胞毒性與細胞功能影響難題的精妙解決

在嘗試提高病毒載體轉(zhuǎn)導效率的過程中，一些輔助試劑或處理方法往往會對細胞產(chǎn)生毒性，影響細胞的正常生長、代謝和功能，甚至導致細胞死亡。這對于需要維持細胞活性和功能完整性的實驗和治療應用來說是一個嚴重的問題。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 采用溫和且生物相容性良好的配方，在顯著提升轉(zhuǎn)導效率的同時，對細胞的毒性極小。經(jīng)過嚴格的細胞毒性測試，在有效提升轉(zhuǎn)導效率的濃度范圍內(nèi)，細胞的存活率、增殖能力以及關(guān)鍵生物學功能均未受到明顯影響。例如，在對干細胞進行基因轉(zhuǎn)導時，使用 ViralBoost Reagent 不僅能夠高效地將目的基因?qū)敫杉毎?，而且干細胞依然能夠保持其多能性和分化潛能，為干細胞治療相關(guān)研究提供了可靠的技術(shù)支持。

產(chǎn)品優(yōu)勢

★ 顯著提高病毒產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達10倍。這一特性使其成為高滴度病毒生產(chǎn)的理想選擇。

★ 廣泛的適用性

無論是逆轉(zhuǎn)錄病毒還是慢病毒，ViralBoost Reagent都能有效增強其包裝效率。其廣泛的適用性使其適用于多種病毒系統(tǒng)和細胞類型，包括HEK 293T細胞等常用細胞系。

★ 低成本，高效益

通過顯著提高病毒顆粒的產(chǎn)量，ViralBoost Reagent幫助實驗室在不增加成本的情況下實現(xiàn)高滴度病毒生產(chǎn)。這不僅節(jié)省了時間和資源，還提高了實驗的整體效率。

★ 簡單易用

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細胞后6-14小時，只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中，即可繼續(xù)培養(yǎng)。這種簡單的實驗方案使其適合各種規(guī)模的病毒包裝實驗。

★ 穩(wěn)定的性能

每一批次的ViralBoost Reagent都經(jīng)過嚴格的功能測試，確保其在病毒包裝中的高效性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品在4℃下可穩(wěn)定保存12個月。

訂購信息

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，專門用于高滴度病毒生產(chǎn)。它通過在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達10倍。

品名：ViralBoost Reagent（VB100）

貨號：VB100

規(guī)格：1 ml

濃度：500X

儲存溫度：4°C

穩(wěn)定性：在4°C條件下保存，有效期為12個月。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

•  Lentiviral Packaging Mix（VP100）：用于慢病毒包裝。

•  Lentivirus Precipitation Solution（VC100）：用于慢病毒濃縮。

•  NanoFect Transfection Reagent（NF100）：用于高效基因轉(zhuǎn)染。

使用方法

以下是使用ViralBoost Reagent進行病毒包裝的典型流程：

1.第一天：細胞鋪板

用1x明膠涂布培養(yǎng)皿或平板30分鐘。吸出明膠，每100 mm平板接種約3-4×10?個HEK 293T細胞。每個平板使用10 ml培養(yǎng)基。

注意：確保細胞懸液分散均勻，避免細胞聚集。

2.第二天：轉(zhuǎn)染

準備兩個試管，分別加入0.5 ml DMEM。

在一個試管中加入病毒載體和包裝混合物的DNA，輕敲試管使其充分混合。

在另一個試管中加入NanoFect轉(zhuǎn)染試劑（貨號NF100），輕敲試管混合。

將NanoFect-DMEM混合物轉(zhuǎn)移到DNA管中，上下吸移2-3次，渦旋5-10秒，充分混合。

在室溫下孵育15分鐘，使NanoFect/DNA復合物自組裝。

將NanoFect/DNA混合物滴加到平板中，輕輕搖動平板并放回培養(yǎng)箱。

3.第三天：更換培養(yǎng)基并添加ViralBoost

吸出上清液，用10 ml新鮮培養(yǎng)基替換，并加入20 µl ViralBoost Reagent（500X）。

將平板放回細胞培養(yǎng)箱。

4.第四天：收集病毒

小心收集上清液至50 ml離心管中，置于冰上。

在4°C下，以1000×g離心10分鐘，去除細胞碎片。

使用0.45 µm過濾器過濾上清液，并將過濾后的上清液轉(zhuǎn)移至無菌容器中。

按照每4體積病毒上清液加入1體積的冷逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒沉淀溶液（貨號VC100或VC200）進行濃縮。

5.第五天：濃縮病毒

在4°C下，以1500×g離心30分鐘。

離心后，病毒顆?？赡茉谌萜鞯撞啃纬擅咨虬咨恋?。

丟棄上清液，用1500×g離心5分鐘去除殘留液體。

用冷的無菌PBS或DMEM以原始體積的1/10至1/100重懸病毒沉淀，分裝至低溫小瓶中，并在-80°C下保存。

6.注意事項

使用前確保試劑充分溶解并混合均勻。

操作過程中需小心處理病毒材料，避免溢出。使用漂白劑對危險液體進行消毒（終濃度為10%，持續(xù)30分鐘）。

僅用于研究目的，不得用于診斷或治療程序。

基因治療中具體應用

在基因治療領(lǐng)域，病毒載體的高效生產(chǎn)是實現(xiàn)臨床應用和商業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。然而，傳統(tǒng)的病毒載體生產(chǎn)方法往往面臨產(chǎn)量低、成本高、工藝復雜等問題。alstemBio的ViralBoost Reagent（VB100）通過顯著提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度，為基因治療提供了強大的助41力。

1. 顯著提高病毒載體產(chǎn)量

ViralBoost Reagent是一種新型的小分子混合物，能夠在轉(zhuǎn)錄水平上穩(wěn)定調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，從而顯著提高逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒顆粒的產(chǎn)量，最高可達10倍。這對于基因治療中常用的病毒載體（如AAV、LV等）的生產(chǎn)具有重要意義。例如，在HEK 293T細胞中使用ViralBoost Reagent后，GFP慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導效率顯著提升，流式細胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示病毒顆粒產(chǎn)量大幅提升。

2. 優(yōu)化病毒載體生產(chǎn)效率

基因治療中常用的病毒載體（如AAV）在生產(chǎn)過程中常面臨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（ER stress）和未折疊蛋白響應（UPR）等問題，這些問題會限制病毒載體的產(chǎn)量。ViralBoost Reagent通過調(diào)節(jié)病毒RNA的包裝，能夠有效緩解這些問題，從而提高病毒載體的生產(chǎn)效率。

3. 降低生產(chǎn)成本

通過顯著提高病毒載體的產(chǎn)量，ViralBoost Reagent能夠有效降低基因治療藥物的生產(chǎn)成本。這對于基因治療的商業(yè)化和大規(guī)模應用至關(guān)重要。例如，傳統(tǒng)的AAV載體生產(chǎn)方法通常只能達到10?-1011 VG/mL的滴度，而使用ViralBoost Reagent后，滴度可顯著提高。

4. 廣泛的適用

ViralBoost Reagent適用于多種病毒載體的生產(chǎn)，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺相關(guān)病毒（AAV）。這種廣泛的適用性使其成為基因治療研究和生產(chǎn)的理想選擇，能夠滿足不同實驗室和應用場景的需求。

5. 簡化操作流程

ViralBoost Reagent的操作流程非常簡便。在轉(zhuǎn)染HEK 293T細胞后6-14小時，只需將ViralBoost Reagent以1/500的體積比例加入新鮮培養(yǎng)基中即可。這種簡單的操作流程不僅節(jié)省了時間和人力，還減少了因操作復雜導致的誤差。

6. 支持基因治療的臨床應用

在基因治療的臨床應用中，高滴度的病毒載體是實現(xiàn)有效基因遞送的關(guān)鍵。ViralBoost Reagent通過提高病毒載體的產(chǎn)量和滴度，能夠更好地滿足臨床試驗和商業(yè)化生產(chǎn)的需求。例如，在AAV載體的生產(chǎn)中，使用ViralBoost Reagent后，病毒基因組滴度和包裝效率顯著提高，這對于需要高劑量病毒載體的基因治療項目尤為重要。

ALSTEM Bio 是一家成立于2012年的創(chuàng)新型生物技術(shù)公司，總部位于美國舊金山灣區(qū)。公司專注于誘導多能干細胞（iPSC）重編程技術(shù)、干細胞誘導和基因編輯相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)，并提供定制化服務。未來ALSTEM Bio 將繼續(xù)致力于開發(fā)創(chuàng)新的干細胞研究工具和基因編輯技術(shù)，推動再生醫(yī)學和個性化醫(yī)療的發(fā)展