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clickchemistrytools DADPS Biotin Azide說(shuō)明書

更新時(shí)間:2023-08-29      點(diǎn)擊次數(shù):486

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該試劑包含通過(guò)含有可裂DADPS接頭的間隔臂連接到疊氮化物部分的生物素部分在溫和的條件下(10%甲酸,0.5 h),捕獲的生物分子可以被有效地釋放,并且小分子片段(143 Da)在切割后留在標(biāo)記的蛋白質(zhì)上。

鏈露親和泰、生物素相互作用的非凡強(qiáng)度允許有效捕獲基至高度稀釋的目標(biāo);然而,這使得以親和樹(shù)脂中回收蛋白質(zhì)具有挑性,從固定化抗生物素蛋白中洗脫生物素化蛋白質(zhì)的常規(guī)方法包括下:通過(guò)在可能包含高濃度離液鹽的變性緩中液中煮沸樹(shù)脂使鏈毒抗生物素蛋白變性,(當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)與樹(shù)脂結(jié)合時(shí)用胰蛋白酶消化蛋白質(zhì),或用時(shí)量游離生物泰洗脫蛋白質(zhì),這些方案可以通過(guò)釋放非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和/或天然生物泰化的蛋白質(zhì)與標(biāo)記的蛋白質(zhì)同時(shí)共洗脫污染的蛋白質(zhì),此外,這些方法中的一些會(huì)導(dǎo)致高水平的樹(shù)脂基膚與目標(biāo)蛋白質(zhì)一起洗脫,導(dǎo)致進(jìn)一步的樣品污染.

DADPS(二氧基二苯基磚烷生物素疊氮化物探針消除了鏈毒親和素、生物素親和純化的主要限制,該試劑包含通過(guò)含有可裂解DADPS接頭的間置連接到疊網(wǎng)化物部分的生物素部紛,在溫和的條件下5%或10%甲酸,0.5 h),捕獲的生物分子可以被有效地釋放,并且切割后小分子片段(143 Da)留在標(biāo)記的蛋白質(zhì)上,這些特征使得DADPS探針在用于生物分子標(biāo)記和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中特別有吸引力。



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