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rndsystems Cultrex 低生長因子基底膜提取物說明書

更新時間:2021-11-05      點擊次數(shù):1836


rndsystems Cultrex 低生長因子基底膜提取物說明書

Cultrex 低生長因子基底膜提取物

Cultrex 低生長因子基底膜提取物,2 型,Pathclear


對于穩(wěn)健的類器官培養(yǎng) - 低生長因子基底膜提取物
目錄 #
3533-001-02
3533-005-02
3533-010-02

Cultrex 低生長因子基底膜提取物,2 型,Pathclear 摘要

Cultrex 低生長因子基底膜提取物 (RGF BME),2 型特別有資格支持穩(wěn)健類器官培養(yǎng)的建立和擴(kuò)展。它的成分模擬體內(nèi)微環(huán)境,以提高類器官的攝取率和生長。

主要優(yōu)勢

• 有資格用于類器官細(xì)胞培養(yǎng)
• 常用的穩(wěn)健和成熟的類器官系統(tǒng)
• 減少生長因子配方提供更明確的培養(yǎng)系統(tǒng)
• 質(zhì)量控制以確保性能一致性

為什么使用 Cultrex RGF BME,類型 2?

Cultrex 低生長因子基底膜提取物 (RGF BME),2 型是從 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤中純化的基底膜的可溶性形式。這種提取物提供了一種天然細(xì)胞外基質(zhì)水凝膠,可在 37°C 下聚合形成重建的基底膜。基底膜是連續(xù)的特殊細(xì)胞外基質(zhì)片,形成內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞或神經(jīng)元細(xì)胞與其相鄰基質(zhì)之間的界面,并通過影響細(xì)胞粘附、遷移、增殖和分化在組織組織中發(fā)揮重要作用。BME 的主要成分包括層粘連蛋白、IV 型膠原蛋白、內(nèi)聯(lián)蛋白和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖。

Cultrex RGF BME, Type 2 提供了一種專有配方,具有高拉伸強(qiáng)度,專為穩(wěn)健的組織類器官培養(yǎng)以及需要細(xì)胞外基質(zhì)支架的其他應(yīng)用而設(shè)計。

使用 Cultrex RGF BME,2 型進(jìn)行類器官細(xì)胞培養(yǎng)的方案。

Cultrex RGF BME,2 型非常適合用作類器官和 3D 細(xì)胞培養(yǎng)的支架。下面列出的是我們的研發(fā)團(tuán)隊為類器官培養(yǎng)設(shè)計的方案,其中包含 Cultrex RGF BME、2 型以及來自 Bio-Techne 的生長因子、培養(yǎng)基補(bǔ)充劑和小分子。

規(guī)格

來源
鼠 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤
蛋白質(zhì)濃度
8-12 mg/mL 由 Lowry 測定確定
內(nèi)毒素水平
≤ 8 EU/mL 鱟變形細(xì)胞裂解物 (LAL) 測定
無菌測試
按照 USP<71>無菌指南進(jìn)行測試。
測試細(xì)胞培養(yǎng)
類器官培養(yǎng)- Cultrex RGF BME,2 型支持小鼠小腸類器官祖細(xì)胞的生長和擴(kuò)增。

凝膠測定- Cultrex RGF BME,2 型在 37 °C 下在不到 30 分鐘內(nèi)凝膠,并在培養(yǎng)基中在 37 °C 下保持凝膠形式至少 14 天。

圓頂檢測Cultrex RGF BME,2 型在細(xì)胞培養(yǎng)板上形成并保持穩(wěn)定的 3-D 圓頂結(jié)構(gòu)。

管形成分析- Cultrex RGF BME,2 型支持人(HBMVEC;HUVEC)或小鼠(SVEC4-10)內(nèi)皮細(xì)胞形成毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)。
病毒檢測
總共 31 種生物體和病毒的 PCR 檢測結(jié)果為陰性,包括:支原體、17 種通常包含在小鼠抗體生產(chǎn) (MAP) 檢測中的細(xì)菌和病毒株,以及 13 種額外的鼠傳染性病原體,包括 LDEV。
穩(wěn)定
產(chǎn)品在 ≤ -70 °C 下儲存時,自生產(chǎn)之日起至少兩年內(nèi)是穩(wěn)定的。有關(guān)有效期,請參閱批次特定的分析證書。
運(yùn)輸條件
產(chǎn)品隨附干冰或等效物。收到后,立即將其存放在產(chǎn)品標(biāo)簽上建議的溫度下。
貯存
將未開封的產(chǎn)品儲存在 -70 °C。使用手動除霜冷凍機(jī),避免重復(fù)凍融循環(huán)。
物種

限制

僅供研究使用。不用于診斷用途。


 

數(shù)據(jù)示例

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使用 2 型 Cultrex RGF BME 培養(yǎng)的人類腸道類器官。使用 分別從橫結(jié)腸和回腸活檢組織中分離的細(xì)胞培養(yǎng) 人類橫結(jié)腸類器官(A、B)和人類回腸類器官(C、D)類器官作為支架基質(zhì)嵌入 Cultrex RGF BME,2 型。A) 人體橫向類器官的明場圖像。B) 使用山羊抗人/小鼠 E-鈣粘蛋白抗原親和純化的多克隆抗體(綠色;目錄編號AF748)、MUC2 抗體(紅色;目錄編號NBP2-44431)和 DAPI(藍(lán)色)染色的人橫向類器官 。C) 人類回腸類器官的明場圖像。D) 使用醛縮酶 B 抗體(紅色;目錄號NBP2-15345)、人鈣粘蛋白-17 抗體(綠色;目錄號MAB1032和 DAPI(藍(lán)色)染色的人回腸類器官。

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在 2 型 Cultrex RGF BME 中形成 HepG2 球體。 通過將 HepG2 肝肝癌細(xì)胞(每孔 10,000 個細(xì)胞)鋪在涂有 5 mg/mL Cultrex RGF BME 2 型的 24 孔板中形成肝細(xì)胞球體。在通過明場顯微鏡成像前培養(yǎng) 21 天。

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在 2 型 Cultrex RGF BME 中 培養(yǎng)的小鼠腸道類器官。在 2 型 Cultrex RGF BME 中培養(yǎng)的小鼠腸道類器官被浸沒固定并處理以進(jìn)行整體染色或石蠟包埋和切片以進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)。A)使用山羊抗人/小鼠 E-鈣粘蛋白抗原親和純化的多克隆抗體(綠色;目錄編號AF748)在室溫下以 10 µg/mL染色整個小鼠腸道類器官3 小時。細(xì)胞用 DAPI(藍(lán)色)復(fù)染。B)石蠟包埋的小鼠腸道組織,針對人鈣粘蛋白-17 抗體(綠色;目錄號MAB1032)、人 Ki67/MKI67 抗體(紅色;目錄號AF7617)進(jìn)行染色),并用 DAPI(藍(lán)色)復(fù)染。

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Cultrex RGF BME 中肝臟類器官的形成和分化,2 型。 人肝臟類器官來源于人活檢組織。未分化的類器官是通過將分離的組織嵌入 Cultrex RGF BME 2 型并在專門培養(yǎng)基中培養(yǎng)而形成的。使用含有重組人 FGF-19(貨號 # 969-FG)、DAPT(貨號 # 2634)和地塞米松(貨號 # 1126)的培養(yǎng)基區(qū)分類器官。A)未分化的肝臟類器官。B)肝臟類器官在分化時會縮小。C) 分化的肝臟類器官表達(dá)肝細(xì)胞標(biāo)志物、白蛋白和 HNF3 β 以及 E-鈣粘蛋白的代表性圖像。

在 2 型 Cultrex RGF BME 中培養(yǎng)的人肺類器官查看大圖

人肺類器官培養(yǎng)在Cultrex BME RGF,類型2 A)人肺類器官的代表性圖像明使用Cultrex BME RGF,類型2中培養(yǎng)B)的Sox2(綠色的表達(dá);目錄號AF2018)和乙?;⒐艿鞍祝t色; Novus公司生物制品,目錄號NB600-567)。C) p63/TP73L(綠色;目錄# AF1916)和細(xì)胞角蛋白10(紅色;Novus Biologicals,目錄# NBP2-61736)的表達(dá)。D)Podoplanin(綠色;目錄號AF3670)作為 1 型肺泡細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)。

 

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