jetPRIME ^®

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轉(zhuǎn)染效率

jetPRIME ^®是一種適用于日常實驗的強大轉(zhuǎn)染試劑。它導致各種來源的轉(zhuǎn)染貼壁細胞系以及原代細胞的比例異常高。

 與競爭對手的試劑相比，使用 jetPRIME ^®試劑獲得了 70% 至 90% 的轉(zhuǎn)染效率（圖 1 和圖 2）。

圖 1：jetPRIME 與其主要競爭對手的轉(zhuǎn)染效率比較。在 24 孔板中轉(zhuǎn)染后 24 小時，通過 FACS 分析在各種細胞系中評估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對 Lipofectamine ^® 2000 和 jetPRIME ^®的推薦使用條件。

圖 2：jetPRIME ^®與 Lipofectamine ^® 3000 的轉(zhuǎn)染效率比較。在 96 孔板或 24 孔板中轉(zhuǎn)染后 24 小時，通過 FACS 分析在各種細胞系中評估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對 lipofectamine ^® 3000 和 jetPRIME ^®的推薦使用條件。

成本效益：更少的 DNA 和更少的試劑

jetPRIME ^® 是一種強大的體外轉(zhuǎn)染試劑，需要少量試劑和質(zhì)粒 DNA，因此使用起來非常經(jīng)濟高效 （表 1）。

表 1：推薦使用條件。根據(jù)制造商的建議，用于轉(zhuǎn)染的 6 孔板中每孔 DNA 和試劑（jetPRIME ^®和競爭對手）的數(shù)量。

除了降低成本之外，使用更少的 DNA 還可以最大限度地減少轉(zhuǎn)染引發(fā)的不利細胞毒性作用。因此，jetPRIME ^® 是實現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率和出色細胞活力的試劑。

更好的細胞活力

jetPRIME ^® 在轉(zhuǎn)染過程中對細胞極其溫和，從而提高細胞活力并改善轉(zhuǎn)染結(jié)果。用 jetPRIME ^®轉(zhuǎn)染的細胞 是健康的，而競爭者則觀察到主要的細胞毒性（圖 3）。

圖 3：轉(zhuǎn)染后 24 小時的細胞活力。根據(jù)制造商對每種試劑的建議，在轉(zhuǎn)染后 24 小時對 HeLa 細胞進行相差顯微鏡檢查。

易于使用的協(xié)議

jetPRIME ^® 是一種易于使用的轉(zhuǎn)染試劑（圖 4）：

• 快速且輕松地擴大和縮小規(guī)模
• 與血清和抗生素兼容

圖 4：jetPRIME ^®協(xié)議。方便的 DNA、siRNA 和 DNA 和 siRNA 共轉(zhuǎn)染方案。

在我們的博客部分查看我們的 專家提示，以加快 DNA 轉(zhuǎn)染。

應用

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

jetPRIME ^®導致各種來源的轉(zhuǎn)染貼壁細胞系以及原代細胞的比例非常高（表 1）。

表 1：使用 jetPRIME ^®的各種細胞類型的轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染后 24 小時通過 FACS 分析確定 GFP 陽性細胞的百分比。

質(zhì)粒是在細菌中常見的環(huán)狀 DNA 小分子。質(zhì)粒與染色體 DNA 分開存在和復制，并且在細菌中它們通常攜帶有利于細菌生存的基因。質(zhì)?？杀挥幸庖胨杓毎⒂糜谠谔囟毎抵羞^表達感興趣的基因。此過程稱為 DNA 轉(zhuǎn)染，是研究基因功能或目標蛋白質(zhì)的常用方法。

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基因組編輯

CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在哺乳動物細胞中的使用最近成為一種在特定位點修改細胞基因組的非常方便的方法。它涉及將 (a) 一個或多個編碼 Cas9、特定 gRNA 和最終插入序列的質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染到哺乳動物細胞中，或 (b) 一個或兩個質(zhì)粒和一個 RNA 分子（gRNA）的混合物.

可用應用說明： 使用 jetPRIME ^{® 進行}CRISPR/Cas9 介導的基因破壞。

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siRNA轉(zhuǎn)染

jetPRIME ^® 導致多種細胞系中內(nèi)源基因表達的抑制率超過 90%。例如，jetPRIME ^®介導的HeLa 細胞轉(zhuǎn)染與10 nM siRNA 雙鏈體靶向HeLa 細胞中的內(nèi)源性核纖層蛋白A/C 顯著降低了核纖層蛋白A/C 基因的表達水平（圖1）。

圖 1：使用 jetPRIME ^{® 的}內(nèi)源性 lamin A/C 靜音。用 10 nM 的 21-mer 核纖層蛋白 A/C siRNA 轉(zhuǎn)染 HeLa 細胞。48 小時后，使用抗 lamin A/C 抗體通過免疫熒光顯微鏡評估 lamin A/C 沉默。

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不同核酸的共轉(zhuǎn)染

jetPRIME ^® 非常適用于 DNA 和 siRNA/miRNA共轉(zhuǎn)染實驗或多種 DNA 質(zhì)粒的共遞送。

我們使用 jetPRIME ^®進行了 DNA 和 siRNA 遞送，并在各種細胞系中觀察到高效的基因沉默且毒性極低。使用 10 nM siRNA 在貼壁細胞中實現(xiàn)了超過 90% 的沉默（圖 2）。

圖 2：使用 jetPRIME ^{® 共}轉(zhuǎn)染 DNA 和 siRNA 后，幾種細胞系中的外源熒光素酶沉默。在 6 孔板中，每孔使用 400 ng p4CMV-Luc 和 10 nM 熒光素酶 siRNA 進行實驗。

質(zhì)量

每批 jetPRIME ^®試劑都通過用表達 GFP 的質(zhì)粒對 HeLa 細胞進行 DNA 轉(zhuǎn)染進行內(nèi)部測試，并且每瓶試劑都提供分析證書。