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invivogen LyoVec說明書

更新時間:2021-04-23      點擊次數(shù):2440

 

invivogen提供了廣泛的試劑,工程細胞系和測定試劑盒,可滿足您對先天免疫和哺乳動物細胞表達的研究需求。

對于細胞培養(yǎng),我們提供微生物污染的解決方案,以及選擇性抗生素內(nèi)毒素檢測試劑盒。

我們還提供了一個擴展的報告細胞系集合,以監(jiān)測由細胞因子或模式識別受體(PRR)配體誘導的細胞內(nèi)信號傳導途徑

對于主要的PRR信號通路,我們提供相關(guān)配體,抑制劑抗體的家族。

此外,我們提供了多種人類和鼠類基因,細胞啟動子以及用于不同應(yīng)用的克隆和表達載體的選擇。

 

 

細胞轉(zhuǎn)染

表達GFP的質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染

用表達GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染THP-1細胞

細胞轉(zhuǎn)染包括將“外源”核酸(例如質(zhì)粒或siRNA)引入細胞中,以分別過表達或沉默目的基因。轉(zhuǎn)染可以在各種細胞環(huán)境中對特定基因的表達進行功能評估。根據(jù)核酸的類型以及細胞的類型,可以使用許多不同的轉(zhuǎn)染方案。轉(zhuǎn)染的三種主要方法是化學的(例如陽離子脂質(zhì)),物理的(例如電穿孔)和生物的(例如病毒轉(zhuǎn)導)。新引入的核酸可以是瞬時存在的,從而該基因僅在有限的時間段內(nèi)表達而不能復制,也可以穩(wěn)定地存在,由此該基因整合到受體細胞的基因組中。細胞轉(zhuǎn)染后 

仍難以轉(zhuǎn)染的細胞(例如免疫細胞)通常會表達能檢測外源核酸的強效胞質(zhì)傳感器。因此,需要轉(zhuǎn)染增強劑或加強劑來禁用這些防御,從而有助于促進核酸表達并大大提高轉(zhuǎn)染成功率。

 

InvivoGen提供:

  • LyoVec™:一種專有的基于陽離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑,屬于磷脂家族。它很容易用于許多細胞系的轉(zhuǎn)染,例如人類胚胎腎-293(HEK-293)細胞系。
     
  • NATE™:一種核酸轉(zhuǎn)染增強劑,可提高瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染效率。它被設(shè)計與轉(zhuǎn)染試劑和推薦用于難以轉(zhuǎn)染的細胞(例如人單核細胞和鼠巨噬細胞(分別為THP-1和RAW 264.7))一起使用的技術(shù)結(jié)合使用。 
     
  • 選擇性抗生素:范圍廣泛的高純度和無內(nèi)毒素的選擇性抗生素,包括彈性蛋白,Zeocin™,嘌呤霉素,G418,潮霉素B金和菌霉素。它們可用于在哺乳動物和細菌細胞中進行選擇 。

 

 

invivogen LyoVec說明書

LyoVec™單位大小貨號
用于轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞的陽離子脂質(zhì)+ 1小瓶的對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物
8ml,160次反應(yīng)
10毫升,200次反應(yīng)
18毫升,360次反應(yīng)
20 ml,400次反應(yīng)
16毫升,320反應(yīng)
LYEC-12

凍干脂質(zhì)基轉(zhuǎn)染試劑

LyoVec™是一種專有的基于陽離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑,屬于磷脂家族。該家族最初被Floch等人描述在體外體內(nèi)使用的有效轉(zhuǎn)染試劑[1-2]。

LyoVec™的主要成分是磷脂DTCPTA,它與DiPPE偶聯(lián),DiPPE是一種中性脂質(zhì),有助于使膜雙層穩(wěn)定并提高LyoVec™的體外轉(zhuǎn)染效率。

如何使用LyoVec™
如何使用LyoVec™

LyoVec ™的應(yīng)用

  • 陽離子脂質(zhì)基轉(zhuǎn)染試劑
  • 核酸絡(luò)合劑

磷脂的正電荷可使LyoVec™與質(zhì)粒DNA結(jié)合,并且該結(jié)構(gòu)可促進與細胞膜的融合,從而實現(xiàn)有效的DNA傳遞。

另外,LyoVec™可用作核酸絡(luò)合劑,以促進細胞進入RNA或基于DNA的寡核苷酸,例如RIG-1配體(例如poly(dA:dT)[3]和poly(I:C) [4])和內(nèi)體TLR7 / 8配體(例如ssPolyU [5])。該復合步驟對于通過病原體識別受體誘導對核酸的有效應(yīng)答是至關(guān)重要的。

 

參考

1. Floch等人, 1997。陽離子磷脂作為非病毒載體,可在造血細胞系和CD34 +細胞中進行DNA轉(zhuǎn)染。血細胞分子與疾病23:69-87。
2. Guillaume-Gable等, 1998。陽離子磷脂作為小鼠肺中非病毒基因轉(zhuǎn)移劑。嗡嗡聲基因The 9:2309-2319。
3. Xie M.等人, 2016。依賴PKM2的糖酵解促進NLRP3和AIM2炎性體激活。Nat Commun。7:13280。 
4.JärverP.等人, 2018。單鏈核酸通過干擾網(wǎng)格蛋白介導的胞吞作用來調(diào)節(jié)TLR3 / 4/7活化。科學8:15841。
5.片芝等人, 2011年。人髓樣樹突狀細胞中的雙鏈DNA和單鏈RNA分別誘導了干擾素-α和白介素12。免疫學。132(2):165-73。

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規(guī)格

動手時間:不超過15分鐘,轉(zhuǎn)染前一天無需任何準備

轉(zhuǎn)染:瞬時穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

條件:在有血清的情況下工作,轉(zhuǎn)染后無需洗滌細胞

保質(zhì)期:質(zhì)粒DNA(pDNA)/ LyoVec™復合物的保質(zhì)期

質(zhì)量控制:

  • LyoVec™的轉(zhuǎn)染效率已在HEK293衍生的細胞中得到證實。 
  • 已經(jīng)評估了HEK293衍生細胞的細胞毒性。
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內(nèi)容

LyoVec™以凍干粉的形式提供,無菌并包裝在密封的玻璃小瓶中。

該產(chǎn)品有不同的格式:

  • lyec-1:5個小瓶(足以在12孔板中進行200個反應(yīng))
  • lyec-2:10個小瓶(足以在12孔板中進行400個反應(yīng))
  • lyec-3  :2個大瓶(足以在12孔板中進行320個反應(yīng))
  • lyec-12:4個小瓶(足以在12孔板中進行160個反應(yīng))和1個對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物。
  • lyec-22:9個小瓶(足以在12孔板中進行360個反應(yīng))和1個對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物。
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