bioacademia 02-701說明書
更新時間:2020-12-21 點擊次數(shù):987
bioacademia 02-701說明書
Product | cDNA Library S. cerevisiae Log Phase cDNA文庫釀酒酵母對數(shù)期 | |
Information | code:02-701 |
|
該cDNA文庫(質(zhì)粒DNA)是由啤酒酵母S288C衍生的poly(A)+ RNA在對數(shù)期通過Linker-Primer方法(參考文獻1)由大阪H. Nojima教授構(gòu)建的。大學。通過使用寡核苷酸(dT)18接頭引物單向克隆該文庫,該引物包含Not I和BamHI(Bgl II)-Sma I銜接子的限制性酶切位點。 該文庫中使用的pLZ3載體(如下所示)不能在啤酒酵母中復制,但包含pUCori以便在大腸桿菌中復制。
應用 已知或未知基因的PCR篩選:準備已知或未知基因(cDNA)的引物并擴增通過從該文庫中PCR克隆該基因,然后克隆至合適的載體。 標準擴增條件:以10-100 ng cDNA為模板,進行35個PCR反應循環(huán)。(根據(jù)目標基因的mRNA的表達率來改變模板的數(shù)量和循環(huán)數(shù)。)
規(guī)格 數(shù)量:在10 mM Tris-HCl-1mM EDTA(pH 7.5)中,500 ng(40 ng / ul 13ul) 質(zhì)量:1)獨立克隆的數(shù)量:3.6 x 106 2)平均插入片段大?。捍笥? kb 存儲:-20℃
參考文獻 1. KoboriM。池田 奈良 加藤 久米川 野島 和川島 “通過改進的方法大規(guī)模分離破骨細胞特異性基因,涉及制備減法cDNA文庫。” Genes Cells 3:459-475(1998)PMID:9753427 2.田中S。和野島 “ Nik1:釀酒酵母的Nim1樣蛋白激酶與Cdc28復合物相互作用并調(diào)節(jié)細胞周期進程。” Genes Cells 1 905-921(1996)PMID:9077450 3. SambrookJ。和RussellDW。分子克隆第11章“ cDNA文庫的制備和基因鑒定”。CSHL出版社(2001) | | 碼 | 數(shù)量 | 價錢 | | 02-701 | 500 ng | 330美元 | |
|
|