progen PRHYPE-XS說明書
噬菌體M13 K07ΔpIII
在包裝普通噬菌體展示噬菌體中提供輔助噬菌體功能。通過pIII感染細(xì)菌。
產(chǎn)品信息:
數(shù)量
5 x 2毫升(凍干)
Cat. No. | Product Name | Quantity | Price |
---|---|---|---|
PRHYPE-XS | Hyperphage M13 K07ΔpIII (1x2mL) | 2 mL (lyoph.) | $135.00 |
Purity | PEG precipitation |
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Packing unit | 5x2 mL (lyoph.) |
從超噬菌體包裝的圖書館中分離重組抗體,蛋白質(zhì)或肽的有效工具。
Rondot等人開發(fā)了一種輔助噬菌體技術(shù)(“超噬菌體系統(tǒng)”)。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系統(tǒng)可通過增加每個噬菌體顆粒展示的抗體數(shù)量(多5個對0.01個)來改善在噬菌體展示中的抗體展示,因此該系統(tǒng)在功能基因分析和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域具有巨大優(yōu)勢。淘選噬菌體可以用少量抗原和更高的效率進(jìn)行。例如,通過在二維凝膠電泳后在蛋白斑點的印跡上采用超噬菌體包裝的文庫淘選,可以改善通用庫在抗體分離中的應(yīng)用。
可以通過針對合成的膜結(jié)合肽表位淘選來分析大量開放閱讀框(ORF)。在癌癥研究中,超噬菌體包裝庫可能是通過在細(xì)胞表面上淘洗來發(fā)現(xiàn)新腫瘤標(biāo)志物的工具。
巨噬細(xì)胞在pIII基因中帶有一個缺失。它們由產(chǎn)生功能性pIII的大腸桿菌包裝細(xì)胞系產(chǎn)生,該功能性pIII用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。產(chǎn)生的巨噬細(xì)胞在其表面上帶有功能性pIII,但基因組中缺少pIII基因。然后,這些巨噬細(xì)胞可用于通過噬菌粒文庫感染細(xì)菌。每個產(chǎn)生的展示噬菌體在其表面上攜帶抗體或肽的幾個拷貝,從而顯著提高淘選效率。
通過使用巨噬細(xì)胞,抗原結(jié)合提高了兩個數(shù)量級以上。此外,由于攜帶抗體的質(zhì)粒(噬菌粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點,因此可以通過蛋白酶處理洗脫超噬菌體包裝的文庫,從而洗脫高親和力的結(jié)合物,并恢復(fù)野生型感染性表型以優(yōu)化目的抗體基因的回收。
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