Trialtus Bioscience,LLC(www.trialtusbioscience。。com)為生命科學(xué)家提供了用于生產(chǎn)和純化基因工程蛋白的工具。我們新穎的親和標(biāo)簽系統(tǒng)只需一步即可提供超高純度和高產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。CL-7親和標(biāo)簽蛋白純化系統(tǒng)已獲得阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校(UAB)的TriAltus Bioscience的許可,現(xiàn)已可商購(gòu)。
活化的Im7樹(shù)脂包含高度特異性的彈性Im7結(jié)構(gòu)域,該結(jié)構(gòu)域與融合到目標(biāo)蛋白的CL7標(biāo)簽(約16 kDa)結(jié)合。用適當(dāng)?shù)牡鞍酌盖懈詈?,靶蛋白從與Im7結(jié)合的CL7中釋放。有1、2、5和15毫升體積的沉降樹(shù)脂(50%懸浮液)可用。
TriAltus的ImM7活化樹(shù)脂多可進(jìn)行100次活化,在重復(fù)使用過(guò)程中保持1:1的摩爾結(jié)合比。Im7活化樹(shù)脂已用于純化多種蛋白質(zhì)-包括膜和多亞基蛋白質(zhì)。
簡(jiǎn)便性–在單個(gè)純化步驟中,此方案可產(chǎn)生具有高產(chǎn)量,高純度和高活性水平的純化蛋白。
可重用性-該IM7樹(shù)脂是可重復(fù)使用,在容量沒(méi)有可觀察到的損失。
彈性- 該IM7樹(shù)脂保留了1:在各種條件下,包括各種鹽和去污劑濃度多個(gè)再活化后1摩爾的結(jié)合比。
規(guī)格書(shū)
顆粒大小| 交聯(lián)的garose 6B 珠(45 - 165 μM )
PH值穩(wěn)定性| Im7蛋白在pH 3-10的珠子上穩(wěn)定。但是,CL7 / Im7結(jié)合僅在pH 4.2 – 10時(shí)穩(wěn)定。
鹽穩(wěn)定性| ≤ 4M NaCl的測(cè)試
裝訂容量| 35-40 mg CL7 / mL 樹(shù)脂
儲(chǔ)存/運(yùn)輸濃度| 50/50緩沖液/樹(shù)脂漿料。在2、4、10和30毫升漿液中分別加入1、2、5和15毫升的沉降樹(shù)脂。
推薦工作溫度| 4°C 或室溫
活化細(xì)節(jié)| 要除去CL7蛋白并重新活化樹(shù)脂,請(qǐng)用Gdn-HCl洗滌色譜柱,將其交換為生理緩沖液。
附加信息:靶蛋白特性(例如蛋白大小,構(gòu)象和濃度);流速(即較低的流速可能會(huì)增加結(jié)合能力);其他參數(shù)(例如pH和溫度)會(huì)影響色譜柱的結(jié)合能力。
中國(guó)科學(xué)家使用TriAltus Bioscience的CL-7純化系統(tǒng)純化CRISPR相關(guān)蛋白
阿拉巴馬州伯明翰(2018年8月29日)— TriAltus Bioscience,LLC今天宣布,中國(guó)湖北大學(xué)的科學(xué)家只需一步即可成功地從大腸桿菌中共表達(dá)和純化了核糖核蛋白復(fù)合物,包括Cas9和Cas12a CRISPR相關(guān)蛋白。使用該公司許可的CL-7凈化技術(shù)。湖北科學(xué)家于7月下旬發(fā)表了他們的工作結(jié)果。
TriAltus Bioscience執(zhí)行官兼聯(lián)合創(chuàng)始人Bob Shufflebarger說(shuō):“該團(tuán)隊(duì)在CRISPR蛋白方面的成功獨(dú)立驗(yàn)證了我們的CL-7純化系統(tǒng),可以有效地純化用于治療研究的一些重要的蛋白。” “我們相信這項(xiàng)技術(shù)將加強(qiáng)科學(xué)研究,解決使用基因工程蛋白質(zhì)的一些挑戰(zhàn),并終幫助降低與生物制藥生產(chǎn)相關(guān)的行業(yè)成本。”
湖北省科學(xué)家在論文中寫道:“通過(guò)利用超高親和力CL7 / Im7純化系統(tǒng),我們?cè)隗w內(nèi)和體外實(shí)現(xiàn)了具有深層核酸酶活性的純Cas RNP的一步純化,表明該方法具有很高的實(shí)用價(jià)值。具有大規(guī)模,低成本,短時(shí)間制備CRISPR相關(guān)核酸酶的潛力。”
該論文還指出:“ [此方法簡(jiǎn)便,經(jīng)濟(jì)高效,可用于制備其他CRISPR相關(guān)核酸酶。”
CRISPR-簇狀規(guī)則間隔的短回文重復(fù)序列的首字母縮寫-是一種基因編輯工具,可有效且特異性地改變生物體內(nèi)的基因。CRISPR相關(guān)(Cas)蛋白(例如Cas9和Cas12a)是CRISPR系統(tǒng)的必需組件,研究人員正越來(lái)越多地使用它們來(lái)尋找治療癌癥,HIV和鐮狀細(xì)胞病等疾病的潛在方法。
TriAltus Bioscience聯(lián)合創(chuàng)始人,UAB的生物化學(xué)和分子生物學(xué)教授Dmitry Vassylyev博士領(lǐng)導(dǎo)了發(fā)明CL-7技術(shù)的團(tuán)隊(duì)。瓦西里耶夫(Vassylyev)在五個(gè)臭名昭著的具有挑戰(zhàn)性的生物分子上測(cè)試了該方法,結(jié)果*。該研究成果于2017年發(fā)表在《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》(PNAS)上。
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