Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品，

        Cygnus公司檢測產(chǎn)品覆蓋了常用于基因工程的培養(yǎng)細胞以及一些用于細胞培養(yǎng)的添加物。CHO細胞即中國倉鼠卵巢細胞（Chinese hamster ovary），該細胞具有不死性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細胞。*批準正式應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預防的基因工程產(chǎn)品約有三十多種，其中只有一種（乙肝疫苗）是由酵母菌生產(chǎn)的，其余所有產(chǎn)品都是由CHO細胞和大腸桿菌生產(chǎn)的，大腸桿菌不能形成有活性的二聚體（如白介素2），也不具有糖基化的功能（如EPO），而CHO卻具有如上的功能，因此CHO成為表達復雜生物大分子的理想宿主。另外CH0細胞在基因工程使用中還有一個優(yōu)點，該細胞屬于成纖維細胞（fibroblast），是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因而檢測起來很困難。

上海起發(fā)現(xiàn)貨Cygnus F300說明書

MRC5 HCP ELISA Kit (F300)

描述

MRC5（人類胎兒肺成纖維細胞）細胞系是生產(chǎn)疫苗的經(jīng)濟有效的方法，可支持多種病毒的生長。我們的檢測資格確定該試劑盒的LOD為?1.8 ng / ml。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品類別：

ELISA試劑盒

存儲：

所有試劑盒試劑2°C至8°C

目標表達系統(tǒng)：

MRC5

物種組：

哺乳動物

種類：

人的

預期用途

本試劑盒用于測定MRC5細胞重組表達產(chǎn)物中MRC5宿主細胞蛋白雜質(zhì)的存在。

該工具包僅用于研究和制造，不用于人類或動物的診斷用途。

總結(jié)與說明

在mrc5細胞系中進行重組蛋白表達或病毒復制是生產(chǎn)疫苗或其他治療性蛋白的一種經(jīng)濟有效的方法。

這些產(chǎn)品中的許多是作為治療劑用于人和動物，因此必須高度純化。制造業(yè)和

這些產(chǎn)品的純化過程使得MRC5中的宿主細胞蛋白（HCP）有可能產(chǎn)生雜質(zhì)。這些雜質(zhì)會降低治療劑的療效，并導致不良的毒性或免疫反應(yīng)。因此，將hcp雜質(zhì)降低到低水平是可取的。通常采用western blot和elisa等抗hcp抗體的實用免疫學方法。雖然western blot是一種有助于鑒別hcps的有效方法，但它有許多局限性。western blot是一個復雜的、依賴于技術(shù)的過程，需要主觀的

結(jié)果解釋。此外，它本質(zhì)上是一種定性方法，不適合于獲得定量答案。western blot的靈敏度受到可檢測樣品體積和高濃度預期產(chǎn)品干擾的嚴重限制。雖然western blot可以在純化過程中檢測到上游樣品中的hcps，但它往往缺乏足夠的敏感性和特異性來檢測純化下游和終產(chǎn)品中的hcps。本試劑盒采用微量平板免疫酶聯(lián)免疫吸附試驗（elisa）方法，克服了western blots檢測靈敏度高達100倍的局限性，操作簡便，靈敏度高，客觀。半定量elisa是一種有助于純化工藝優(yōu)化、工藝控制、常規(guī)質(zhì)量控制和產(chǎn)品釋放度檢測的有效方法。該試劑盒是“通用”的，其目的是與所有可能污染產(chǎn)品的六氯環(huán)己烷反應(yīng)，而不受凈化過程?？贵w已經(jīng)產(chǎn)生并具有親和力 用溫和的MRC5細胞裂解液純化，得到HCP，通常在初始產(chǎn)品回收步驟中遇到。western blot作為一種初步的方法，證實抗體對page分離得到的大多數(shù)hcp條帶有反應(yīng)。如果你需要一種更敏感和更具體的方法來證明你的樣品中的單個HCP的反應(yīng)性，如果你需要一種更敏感的方法來證明你的過程中HCP的覆蓋率，Cygnus Technologies推薦一種優(yōu)于Western Blot的方法，稱為抗體親和提?。╝ae）。aae-is對western blot的敏感性和特異性大大提高，使其成為elisa中抗體表現(xiàn)的更好的預測因子。