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laebio K007說明書

更新時(shí)間:2019-02-22      點(diǎn)擊次數(shù):1611

 

laebio專注于新的親和純化蛋白和參與檢測體外 Sumoylation活性的高度特異性抗體 。我們可以為您提供全套的SUMO化蛋白,包括SAEI / SAEII,UBC9,SUMO-1,SUMO-3,立即開始您的SUMO化檢測。   為了篩選針對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶的抗腫瘤藥物,我們提供人類DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I,II ,和II b,和他們的抗體。這些試劑包括TOPO I,TOPO II a,TOPO II b,TOPO I抗體F14,TOPO I抗體T8N,TOPO I檢測試劑盒,TOPO  我藥物篩選試劑盒,TOPO II 抗體,和TOPO II b 抗體。我們還提供蛋白激酶A,DARPP-32,磷酸化DARPP-32,磷酸酶抑制劑-1,磷酸酶抑制劑-1,磷酸酶抑制劑-2,磷酸酶抑制劑-2抗體的催化亞基,為您研究多巴胺能功能。腦。

laebio K007說明書

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

Catalog#K007提供蛋白質(zhì)

 

描述:
該檢測試劑盒含有用于常規(guī)檢測SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標(biāo)記(人拓?fù)洚悩?gòu)酶I蛋白)以允許清楚地檢測反應(yīng)。已經(jīng)證明該測定法適用于粗提物。強(qiáng)烈建議將人類EI,活性物質(zhì)(Cat#P001; P006),人類E II,活性物質(zhì)(Cat#P002; P011)和人類SUMO I,活性物質(zhì)(Cat#P003; P012)與此試劑盒一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人類EI)(Cat#P006)
  • UBC9(人類E II)(Cat#P011)
  • SUMO I(活動(dòng)形式)。(Cat#P012)
  • 人DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體。(Cat#AP006)(凍干的抗體應(yīng)在使用前用100ul H 2 O 重構(gòu)。)
  • 10X的SUMO化反應(yīng)緩沖液。(Cat#B006)(10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

上述試劑適用于50次SUMO化反應(yīng)。

 

測定條件:
SUMO化測定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5,5mM的氯化鎂反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行2,2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

拓?fù)洚悩?gòu)酶I Sumoylation Control Protocol:

  1. 加入2ul 50kd拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段(Cat#B007)作為每個(gè)反應(yīng)的底物。
  2. 在每個(gè)反應(yīng)中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應(yīng)緩沖液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使總體積達(dá)到20μl 。
  3. LAE SUMO化蛋白的反應(yīng)濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml
          為對(duì)照測定的推薦條件是37 ø 30?60分鐘c。。
     
  4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀釋的提供的拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體進(jìn)行免疫印跡。應(yīng)檢測四個(gè)主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗體(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印跡(12.5%凝膠)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未經(jīng)過酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗體( Cat#AP006)可檢測至少四個(gè)主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol:

  1. 準(zhǔn)備合適的純化底物蛋白。
  2. 在每個(gè)反應(yīng)中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反應(yīng)緩沖液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使終體積達(dá)到20μl。
  3. LAE蛋白的反應(yīng)濃度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

運(yùn)輸/儲(chǔ)存:
此套件隨附干冰,應(yīng)儲(chǔ)存在-70 o C或更低溫度。  

法律考慮:僅供研究使用。

 

 

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