wisegeneusa K003說明書
wisegeneusa的使命是開發(fā),制造和提供新型基因組測序和檢測技術的研究工具。我們將繼續(xù)許可,開發(fā)和商業(yè)化表觀遺傳學中的新基因組測序試劑和方法。
5-羥甲基胞嘧啶是一種DNA甲基化修飾,由鐵依賴性脫氧酶的Tet家族酶促氧化5-甲基胞嘧啶(5-mC)而發(fā)生
關于我們的TAB-seq套件,請注意以下事項。
TAB-seqβGT保護效率說明
關于我們的TAB-seq套件,請注意以下事項:
1.我們提供的5hmC加標對照通過使用5-羥甲基胞嘧啶dNTP混合物的PCR擴增產(chǎn)生。原則上,5hmC加標對照中的所有胞嘧啶應該是100%羥甲基化的。然而,由于商業(yè)化5hmdCTP的雜質和暴露于空氣中5hmC的緩慢氧化,5hmC加標對照中每個胞嘧啶位點的實際5hmC豐度約為80%。結果,即使在標準亞硫酸氫鹽測序中,5hmC加標對照中僅80%的胞嘧啶將被讀作'C'。該數(shù)量(~80%)可能會根據(jù)5hmC加標控制的存儲條件/時間而變化。
為了準確評估TAB-seq中5hmC的保護率,我們建議對含有相同批次的5hmC加標對照的一個樣品進行標準亞硫酸氫鹽測序,以確定其真正的5hmC豐度。例如,如果5hmC加標對照中80%的胞嘧啶在標準亞硫酸氫鹽測序中讀作'C',其中70%在TAB-seq中讀作'C',則表明您的TAB-的實際保護率seq測定應為0.7 / 0.8 = 87.5%但不是70%。
2.在βGT保護后,當使用某種聚合酶(例如Taq聚合酶)時,5hmC對照上的濃密5gmC可能停止聚合。為了避免可能的PCR偏差,建議將PfuTurbo Cx hotstart聚合酶(Agilent)或等同物用于文庫構建中的終PCR擴增步驟。
5mC Tet1氧化試劑盒
5mC Tet1 Oxidation
目錄號:K003
單價:每件套669美元
產(chǎn)品說明
5mC Tet1氧化試劑盒可用于將基因組DNA中的5-甲基胞嘧啶(5mC)轉化為5-羧基胞嘧啶(5caC)用于隨后的測序應用。
每個試劑盒包含足夠的試劑,可根據(jù)推薦的方案進行多達3個全基因組或9個基因座特異性測序反應。
存儲
在抵達時在-80℃儲存5mC Tet1氧化試劑盒。Tet1蛋白對溫度敏感; 應避免多次凍融。
5hmC TAB-Seq Kit
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Catalog No: K001
Unit Price: $969 / per kit
5hmC/5mC TAB-Array Kit (compatible to Infinium 450K Array)
Catalog No: K002
Unit Price: $869 / per kit
5mC Tet1 Oxidation Kit for the PacBio® RS Instrument
Catalog No: K004
Unit Price: $669 / per kit
Catalog No: S002
Unit Price: $30 each
Catalog No: S001
Unit Price: $30 each
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