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Signosis SL-0032-FP 說明書

更新時間:2017-09-07      點擊次數(shù):2660

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signosis是一家專業(yè)從事生命科學領域細胞因子分析,轉錄因子分析等方面的生物技術公司,signosis經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已成為細胞因子行業(yè)品質產(chǎn)品的象征。signosis主要產(chǎn)品涉及細胞因子分析,轉錄因子分析,細胞與細胞的凍,miRNA的研究,基因表達分析,蛋白質相互作用分析,生物標志物分析等領域。signosis致力為客戶帶來更的產(chǎn)品與服務。

 

NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell Line

NFAT熒光素酶記錄Jurkat T穩(wěn)定細胞系

Product NameCatalog #
NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell LineSL-0032-FP

描述: 

NFAT響應性熒光素酶報告基因Jurkat T穩(wěn)定細胞系來自人T淋巴細胞,并在NFAT響應元件的控制下穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶報告基因。該細胞系是用于監(jiān)測由刺激治療,強制基因表達和基因敲除引發(fā)的鈣信號通路的激活的理想細胞模型。

原理

NFAT是轉錄因子家族,在免疫反應以及心臟,骨骼肌和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育中起重要作用。NFAT受鈣信號調節(jié)。通過磷酸酶鈣調神經(jīng)磷酸酶的鈣激活,NFATc蛋白從細胞質轉移到細胞核中,與其他蛋白質配合以介導基因表達。NFAT的核進口被PKA和GSK3等激酶阻斷。NFATs也涉及乳腺癌。Signosis已經(jīng)建立了已經(jīng)用NFAT-熒光素酶報告基因構建體穩(wěn)定轉染的NFAT熒光素酶報道細胞系。通過熒光素酶的分析,細胞系可用于監(jiān)測由刺激,復合治療,強制基因表達或基因敲低引發(fā)的NFAT活性的細胞變化。  

通過使用含有NFAT結合位點,螢火蟲熒光素酶編碼區(qū)上游的zui小啟動子以及潮霉素表達載體,然后潮霉素選擇的pTA-NFAT-熒光素酶報道載體轉染建立細胞系。隨后對潮霉素抗性克隆進行PMA +離子霉素誘導的熒光素酶活性篩選。

TF熒光素酶報告原理。  TF熒光素酶報道穩(wěn)定細胞株利用人工啟動子構建體來驅動熒光素酶表達。啟動子區(qū)域可以由順式元件TF結合位點的多個重復序列,來自已知TF下游基因的啟動子區(qū)域的DNA片段或含有推定/已知的TF結合位點的DNA片段組成。TF可以通過細胞外刺激或通過細胞內(nèi)信號傳導途徑激活幾種方式。一旦激活,TF易位于細胞核,并經(jīng)常與相關因子相互作用以驅動基因表達。一旦熒光素酶表達,其可以在酶測定中產(chǎn)生光,并且測量的光量與TF活化的水平正相關。

 

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